Українська   English
ДонНТУ   Портал магистров

Реферат по теме выпускной работы

Содержание

Введение

Многие столетия человечество стремится создать приспособления, которые смогли бы упростить или вовсе решить поставленную задачу за человека.

С каждым днем технологии лабораторной и функциональной диагностики дополняются альтернативными методиками, которые позволяют выявить многие заболевания на ранней стадии и за очень короткий срок. Возможно, в перспективе у людей, проходящих обследование, будут брать на анализ не кровь, а слюну.

Анализ слюны — это современный метод диагностики, который используется для определения различных инфекций в организме. Биохимический анализ слюны направлен на исследование ферментов, которые определяют состояние внутренних органов (печени, почек, желчного пузыря и других). Биохимический анализ один из способов лабораторной диагностики, который очень информативен для врача и отличается высокой степенью достоверности.

Слюна является жизненно необходимой жидкостью в организме человека. Она способствует пережевыванию пищи, формированию пищевого комка, глотанию, защищает ротовую полость, действует как смазочная жидкость. Анализ слюны помогает определить какие-то проблемы в организме еще на ранней стадии их развития.

Слюна выделяется слюнными железами человека практически непрерывно. Без нее было бы просто невозможно нормальное функционирование многих органов. Такая множественная функциональность слюны в первую очередь связана с ее жидкостными характеристиками, а также специфическими компонентами. Это доказывает анализ слюны. Как жидкость слюна активно участвует в процессах пищеварения, защите полости рта, речи. Ее основные компоненты помогают борьбе с микробами, защите слизистой оболочке.

1. Актуальность темы

В настоящее время исследователи и врачи все больше уделяют внимание изучению слюнных желез (СЖ). Более ста лет назад именно слюнные железы сыграли заметную роль в открытии многих физиологических явлений, особенно в нейрофизиологии.

В настоящее время большую актуальность приобретает использование слюны вместо крови в качестве нетрадиционного материала для клинико-лабораторной диагностики инфицирования вирусами СПИДа, гепатита типа В и др. Исследование слюны имеет ряд преимуществ по сравнению с рутинными методами лабораторной диагностики с использованием крови взятой из пальца или вены. Это прежде всего простота сбора материала, не инвазивность и безболезненность этой процедуры, отсутствие риска инфицирования, возможность многократного получения проб. Поэтому слюна все шире используется не только в клинической практике, но и для проведения гигиенических и токсикологических исследований, также при изучении фармакодинамики лекарственных средств или при обследовании человека в экстремальных условиях.

2. Цели и задачи образовательных услуг

Целью разработки СКС есть постановка предварительного диагноза по биохимическому анализу и мочи.

Для достижения сформулированной цели необходимо разработать СКС которая будет решать следующие задачи:

3. Биохимические исследования слюны в диагностике заболеваний

Исследование слюны является весьма ценным неинвазивным методом оценки общего состояния организма и органов полости рта.

Анализ смешанной слюны с успехом используется для иммуноферментной диагностики гепатитов А, В, С, а также для тестирования ВИЧ-инфекции.

Снижение активности лизоцима в слюне наблюдается у больных раком желудка. Определение α–фетопротеина в слюне используют для диагностики рака печени. При системной красной волчанке уровень специфических IgA в слюне хорошо коррелирует с его содержанием в сыворотке крови. Диагностика порфирий возможна на основании определения порфиринов в слюне. У больных сахарным диабетом достаточно информативными диагностическими тестами является измерение активности цитозольных ферментов (ЛДГ, АсАТ и АлАТ) и иммунореактивного инсулина в смешанной слюне.

Существует корреляция между содержанием в слюне и сыворотке крови алкоголя, никотина, наркотиков, пестицидов и других токсичных веществ.

Определение стероидных и пептидных гормонов является перспективным методом диагностики дисфункций эндокринных желез, стрессорных реакций и циркадных ритмов.

Ферменты смешанной слюны отражают состояние метаболизма органов полости рта. Активация протеолиза при пародонтите способствует повышению содержания аминокислот в составе слюны.

Пародонтит характеризуется повышением активности кислой фосфатазы, катепсин Д и В и гиалуронидазы. При этом содержание лизоцима в слюне значительно уменьшается. Хронический паротит сопровождается увеличением в составе ротовой жидкости соотношение альбуминов и глобулинов.

Достаточно информативным тестом клеточного повреждения при пародонтите является повышение концентрации в ротовой жидкости продуктов свободнорадикального окисления (гидроперекиси, диеновые конъюгаты, малоновый диальдегид).

Состав слюны зависит от характера питания, возраста, состояния организма и других факторов, что требует соблюдения стандартных условий забора и хранения слюны для исследования и клинической оценки ее показателей.

Состав слюны

Рисунок 1 – Состав слюны (анимация: 7 кадров, 5 повторений, 196 килобайт)

Состав слюны изменяется при некоторых заболеваний. При нефрите, осложненном уремией, в слюне увеличивается количество остаточного азота, количество азота увеличивается при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. У больных с сахарным диабетом, хроническим панкреатитом, при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки в слюне увеличивается амилолитическая активность.

Состав слюны человека.

Составляющая Люди, стойкие к кариесу Люди, склонные к кариесу Плазма крови
Уровень секреции, мл/хв 0,4±0,02 0,31±0,02
Осадок, мл/100 мл 6,76±0,38 10,14±0,52
рН 7,25±0,02 7,06±0,03 7,4
Сухой остаток, г/л 15±1,5 70±10
Неорганические вещества, г/л 8±0,8 8–9
Органические вещества, г/л 7±0,7 62±8
Неорганические компоненты, мили-еквив./л (г/л)
Na+ 90 (2,07) 130 (3)
K+ 12,5 – 17,5 (0,5 – 0,7) 5 (0,2)
Ca2+ 2,3±0,05 (0,046±0,001) 2,45±0,05 (0,049±0,001) 5 (0,1)
Mg2+ 3,9 (0,047) 2 (0,024)
Cl- 87,9 (3,12) 105 (3,72)
HPO42- 4,02 (0,193±0,008) 3,5 (0,168±0,006) 0,83 (0,04)
Ca/P 0,257±0,007 1,9 – 2,1
Общий белок, г/л 2,5±0,9 7±0,5
Муцин, г/л 1–3
Ig A, г/л 0,3–0,8
Амилаза, г/л
Лизоцим, г/л		 0,2–0,3
0,15–0,2		 0,0085
Гексозы, г/л 0,13±0,01 0,15±0,04
Гексоза мини, г/л 0,15±0,02 0,16±0,02
Нейраминовая кислота, г/л 0,02±0,002 0,02±0,002
Урановая кислота, г/л 0,02±0,002 0,024±0,002
Молочная кислота, г/л 0,033±0,004 0,045±0,008
Пировиноградная кислота, г/л 0,009±0,001 0,01±0,001
Ферменты (U/л)
Амилаза 2700±130 2260±120
Кислая фосфатаза 0,27±0,02 0,29±0,01 2,2–4,3
Щелочная фосфатаза 0,07±0,003 0,07±0,004 20–50 (24–80)
АлАТ 2,58±0,32 3,6±0,38 12(30)
АсАТ 3,68±0,25 4,92±0,4 8,3(8–27)
Альдолаза 255±11 357±30 2000±8000
Небелковые азотистые компоненты крови (г/л)
Остаточный азот 0,1–0,2 0,3
Азот аминокислот 0,081±0,004 0,077±0,003
Мочевина 0,05–0,1 0,3

4. Лабораторная диагностика заболеваний слизистой оболочки полости рта и пародонта

Постановка диагноза обычно происходит в несколько этапов. При опросе больного врач составляет определенных представлений о характере заболевания, при осмотре — конкретизирует свои предположения. Дальнейшем может возникнуть необходимость в привлечении вспомогательных лабораторно-инструментальных методов исследования, роль которых — подтвердить или опровергнуть вероятность предварительного диагноза. При этом они приобретают решающее значение в распознавании заболевания.

Лабораторные методы диагностики.

Для установления диагноза, подтверждение этиологической роли возбудителя, определения состояния иммунной системы дополнительно используют лабораторные методы исследования.

Общее клиническое исследование крови является важным методом обследования, которого требует каждый больной с патологией СОПР и пародонта.

Показатели Значения в единицах СІ
Эритроциты
у женщин 3,8-4,5 г/л
у мужчин 4,5-5,0 г/л
Гемоглобин
у женщин 120-140 г/л
у мужчин 130-160 г/л
цветной показатель 0,9-1,1
Лейкоциты 4,0-9,0 г/л
Палочкоядерные 1-6%
Сегментоядерные 47-72% (66%)
Эозинофилы 0,5-5%
Базофилы 0-1%
Моноциты 4-10%
Лимфоциты 19-37%
ШОЕ 2-10 мм/год
Ретикулоциты 0,8-1,0%
Тромбоциты 200-300 г/л
Время оседания крови начало — 1 мин 35 с – 2 мин,
окончание — 2 мин 50 с–4 мин.
Время кровотока 3 мин

Безусловно необходимо исследовать кровь больных с язвой и некротическими поражениями и проявлениями геморроя, а также при подозрении на заболевание крови. Анализ крови позволяет уточнить характер заболевания СОПР и пародонта, выявить его возможную связь с патологией органов кроветворения. Так, при некоторых заболевания воспалительного характера с острым течением количество лейкоцитов, а также процент нейтрофилов, лимфоцитов выше нормы, значительно уменьшено количество моноцитов и эозинофилов (ацидофильных гранулоцитов), скорость оседания эритроцитов (СОЭ) увеличена. В случае развития некоторых хронических заболеваний и интоксикации гемограмме может мало изменяться или, наоборот, характеризоваться значительным уменьшением количества эритроцитов, снижением содержания гемоглобина, смещением лейкоцитарной формулы влево, увеличением СОЭ. Неспецифическими тестами аллергизации организма являются: эозинофилия, тромбоцитопения, лейкопения, лимфоцитоз. Значительное уменьшение количества эритроцитов, изменение их формы, снижения уровня гемоглобина в них типичными признаками анемии.

Так называемый патологический лейкоцитоз как защитная реакция имеет место при воспалительных процессах и язвенно-некротических поражениях СОПР, различных проявлениях аллергии и т.д.

Лейкопения может наблюдаться и у здоровых людей (после перегрева, тяжелого физического труда), однако прежде ее следует расценивать как признак серьезных нарушений в организме.

Лимфоциты играют большую роль в выработке иммунитета. Они фиксируют токсины и участвуют в образовании антител (могут превращаться в так называемые плазматические клетки, которые вырабатывают γ-глобулин). Обнаружив те или иные изменения лимфоцитов, врач не только может верно оценить развитие заболевания, но и выработать тактику лечения.

Эозинофилия развивается при повышении уровня гистамина в крови и имеет место при аллергизации организма, иммунных и автоиммунных заболеваниях, глистной инвазии, гистиоцитов Х т.д.

Тромбоциты играют важную роль в остановке кровотечения. В случае разрушения их вследствие повышенной чувствительности к некоторым лекарственным препаратам, при отравлениях определенными химическими лугами и т.д. может развиться тромбоцитопения. Однако не следует забывать о возможности физиологической тромбоцитопении (во время сна, в период менструации). Определение состояния тромбоцитов при некоторых заболеваниях бывает решающим в диагностике, особенно это касается геморрагических синдромов.

Определение кровоточивости десен по количеству гемоглобина в смешанной слюне основано на способности гемоглобина вступать в реакцию с бензидином в кислой среде в присутствии перекиси водорода. Реакция сопровождается образованием голубого окраса, переходящего в бурю.

Используют ацетатный буфер рН 4,6; 0,3% раствор перекиси водорода, приготовленный непосредственно перед определением и гидрохлорид бензидина. В 3 мл слюны эритроциты гемолизують сапонином и центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин. Надосадочная жидкость после центрифугирования содержит растворенный гемоглобин.

В пробирку к 2 мл ацетатного буфера добавляют 1 мл перекиси водорода и 1 мл бензидина, а затем 0,05 мл надосадочной жидкости и отстаивают 1 минуту. Затем пробирку помещают в кювету с рабочей шириной 10 мм и колоримерують на ФЭК-56 при светофильтре № 6. Плотность измеряют 3-4 раза и регистрируют максимальные данные. Через 5 минут окраска приобретает бурый оттенок, и величина оптической плотности начинает уменьшаться.

По величине оптической плотности определяют количество растворенного гемоглобина в граммах на 1 л по калибровочной кривой. Для построения калибровочной кривой используют кровь с точно определенным (с помощью ФЭК-56М) содержание гемоглобина. Динамика показаний характеризует степень кровоточивости.

Цитологический метод. Одним из способов морфологического исследования является цитологический метод, основанный на изучении клеток, их отдельных структур и конгломератов. Метод используют для диагностики заболеваний слизистой оболочки ротовой полости и пародонта в динамике, для контроля эффективности лечения, а также для выявления опухолей челюстно-лицевой области.

Информативность цитологического исследования определяется пунктуальным выполнением главных правил взятия и изготовление препарата.

5. Определение биохимического состава слюны у школьников с различной физической нагрузкой в комплексных гигиенических исследованиях

Слюнные железы тонко реагируют на любые изменения в состоянии внутренних органов и систем организма, будь это патологический процесс или физиологическое состояние. Сбор и анализ слюны один из нетравматичных и новых методов исследований в медицине, он имеет преимущества по сравнению с рутинными методами лабораторной диагностики с использованием крови. Доступность протоков и особенности регуляции слюноотделения создают удобства для исследования секрета желез в диагностических целях и не требуют специальных условий для сбора материала, что удобно при массовых профилактических обследованиях. Эти преимущества имеют важное практическое значение при осуществлении контроля за состоянием здоровья населения (в частности, детей).

Регулярные физические нагрузки являются стрессом для организма, который сопровождается развертыванием общей неспецифической реакции — адаптационного синдрома, что также находит отражение в изменении состава слюны и её структурных свойств. Необходимо отметить, что лишь оптимальные по величине и продолжительности двигательные нагрузки оказывают положительное воздействие на организм. При этом как недостаток, так и избыток двигательной активности представляют собой патогенетический фактор, приводящий к заболеваниям.

Всякое сильное воздействие, психическое или физическое, которому подвергается организм, сопровождается изменением секреторной деятельности коры надпочечников. Глюкокортикоидные гормоны, к которым относится и кортизол, являются основными соединениями, обеспечивающими развитие общего адаптационного синдрома. В последнее время появились работы, в которых указывается на то, что слюна является удобным объектом для исследования кортизола, так как он стабилен и представлен в ней в виде свободной фракции. Большинство исследователей, изучавших гормональный состав слюны, считают, что определение кортизола в слюне может иметь диагностическое значение, хотя при этом приходится учитывать более низкую его концентрацию по сравнению с содержанием его в плазме.

С секрецией кортизола связана динамика концентрации кальция в крови и, соответственно, в слюне. У лиц с высоким содержанием кортизола вследствие непрерывного стресса часто наблюдается потеря кальция, так как при этом тормозится всасывание кальция в кишечной стенке и реабсорбция его в канальцах почек. Кальций является одним из жизненно необходимых минералов, принимающий участие более чем в 300 биологически важных реакциях, среди которых формирование костей, дентина, эмали зубов; обеспечение процессов сокращения мышц, нервной и нервно–мышечной проводимости; участие в коагуляции крови; активация ферментов и эндокринных желез; противовоспалительное, антистрессовое, десенсибилизирующее, противоаллергическое действие; участие в формировании кратковременной памяти и обучающих навыков. Недостаток кальция в детском возрасте приводит к задержке роста, нарушениям осанки, снижению мышечного тонуса, а также к различной соматической патологии, поэтому своевременная диагностика гипокальцием и имеет важное значение в педиатрии.

Выводы

Слюна является клинически информативной биологической жидкостью, но необходимо дальнейшее развитие и проверка этих биомаркеров для внедрения в клиническую диагностику с целью оказания помощи в ранней диагностике рака, для оценки рисков и реагирования на терапию.

Усовершенствование списка биомаркеров слюны зависит от их стабильности и точности обнаружения, включая чувствительность и воспроизводимость анализов, простоту их выполнения, высокую чувствительность и специфичность, легкое определение количества в клинической лаборатории и экономическую эффективность целостности клинико-диагностических алгоритмов. Тем не менее эти новые системы обнаружения требуют дальнейшей оптимизации и проверки до внедрения в рутинную клиническую диагностику.

При написании данного реферата магистерская работа еще не завершена.

Окончательное завершение: июнь 2017 года. Полный текст работы и материалы по теме могут быть получены у автора или его руководителя после указанной даты.

Список источников

  1. White D.A., Scribner A.N., Huang J.V. A comparison of patient acceptance of fingerstick whole blood and oral fluid rapid HI V screening in an emergency department. J. Acquir. Immune Defic.Syndr. 2009; 52(1):75 – 8 p.
  2. Malamud D. Saliva as a diagnostic fluid. Dental Clin. North Am. 2011; 55(1):159 – 78 p.
  3. Lijnen I., Willems G. DNA research in forensic dentistry. Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. 2001; 23(9):511 – 7 p.
  4. Virkler K., Lednev I.K. Analysis of body fluids for forensic purposes: from laboratory testing to non-destructive rapid confirmatory identification at a crime scene. Forensic. Sci. Int. 2009; 188(1–3):1 – 17 p.
  5. Хмелевский Ю.В., Усатенко О.К. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии – 2-е изд., перераб. и доп. К.: Здоров'я, 1987 г. – 160 с.
  6. Руанет В.В. Теория и техника лабораторных работ учеб. пособ. / Под ред. проф. Хетагуровой А.К. – М.:ВУНМЦ Росздрава, 2007 г. – 176 с.
  7. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований – М.: Медецина, 2000 г. – 544 с.